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高速液体クロマトグラフィー(HPLC)は混合物から物質を分離するのに使用されるツールである。特定の化学物質の分離と識別は、主にシステムのクロマトグラフカラムで行われます。 CLAEには多くの列タイプがあり、それぞれのタイプは特定のタイプの分析に使用されます。列C18は一般的に使用される最強の無極性です。長期間連続使用した後、溶媒を通過する溶媒の流量が減少し、分析時間が長くなります。分析時間を短縮するもう1つの理由は、カラム材料に少量の化学物質を残すサンプルがあるため、それらを分離する能力が低下することです。その表面の修復は、材料をいくつかの特定の溶媒で処理して、残っているサンプルからそれを拭き取り、裏材料を活性化することによって行うことができる。
説明書
CLAEの列C18を復元する (Jupiterimages /コムストック/ゲッティイメージズ)-
カラムC18を流れの方向から外し、反対方向に置きます。それを通して溶媒を取り戻すことは、時間が経つにつれて生じる蓄積効果を軽減するでしょう。カラムの最後に大量の材料がたまらないように注意してください。一部の工場では、流れの方向が変わるとメッシュが下の位置にくるように、上端に大きなメッシュを使用しています。この復元方法は、フローリバースと呼ばれます。堆積物がシステム検出器に流れて障害物を引き起こすのを防ぐために、検出器が接続されていない状態でシステムが動作し、カラムの流れを処分するように指示します。
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溶媒通過チューブを一連の溶媒に入れて、カラムに残っている化合物を反対方向に溶出します。これらの溶媒はそれらの親水性特性が異なる。それらを変えることによって、あなたは等しく多様化された親水性の化合物を溶出するでしょう。次の溶媒をそれぞれ50mlずつ使用します:水(緩衝液を使用している場合)、メタノール、イソプロパノール、ジクロロメタン、ヘキサン、ジクロロメタンおよびイソプロパノール。
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カラムを正しい方向に交換し、溶媒を流します。続行する前にそれを洗浄するために少なくとも75ミリリットルを使用してください。新しいパターンのときに使用したパターンでテストを行い、結果を確認してください。最大保持ポイントと分析の合計時間に達したら、注意してください。まだ新しいときにこれらの属性が初期テストと一致する程度は、列が復元された程度を示します。結果が十分でない場合は、列を新しいものと交換し、古いものを捨てます。
必要なもの
- 水温CLAE
- メタノールグレードCLAE
- イソプロパノール級CLAE
- ヘキサン度CLAE
- ジクロロメタングレードCLAE
- 標準逆相