ペトリ皿に栄養寒天を作る方法

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栄養ブロスは、大腸菌などの細菌を培養するために使用されます。このブロスのレシピは、バクテリアの種類や、例えば抗生物質に対する耐性などの遺伝子組み換えの有無によって異なります。ブロスは寒天 - 寒天を添加することによって固化させることができ、それは細菌が異なるコロニーを形成することを可能にするが、液体培養においてそれらは単に容量全体に分散する。これは基本的なテクニックですが、遺伝子クローニングや微生物学的アッセイなどの高度な方法には不可欠です。この論文は、大腸菌の実験室株がルリアブロス寒天プレート（またはペトリ皿）で培養されると仮定している。

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ペトリ皿 （Jupiterimages /コムストック/ゲッティイメージズ）

バクテリアトリプトン10g、酵母エキス5g、塩化ナトリウム5g、寒天またはアガロース15g、1N水酸化ナトリウム1mlを計ります。 1リットルの培地が得られるまで、滅菌したオートクレーブ容量の蒸留水とそれらを混合する。培地をボトルまたはセミキャップフラスコに入れて25分間オートクレーブします。抗生物質や他の栄養補助食品など、高温で破壊される可能性のある試薬を添加する前に、約50℃に冷却してください。
寒天は注ぐ前に容器にくっつくので、オートクレーブした培地を50℃から45℃以上に冷却してください。滅菌ペトリ皿を手に入れ、表面積全体と少なくとも半分の深さを覆うように十分に注ぐ。過剰になるのを避け、できれば寒天をプレートの上の端に近づけないでください。カバーを開いてフードの1つの角を残して、滅菌環境（例えば、層流チャンバーの下）で固化を待ちます。
プレートを乾かします。それらは固体になるとすぐに使用することができるが、いくらかの水分が寒天の表面に存在し、それはバクテリアのコロニーが十分に付着するのを妨げるであろう。したがって、バクテリアを塗布する前に、例えば層流チャンバーまたは37℃のインキュベーター内で数日間または30分間室温に放置することによってプレートを乾燥させることをお勧めします。
プレートを保管する。乾燥したプレートを上下逆さまにして積み重ね、元の梱包材に入れ、テープで密封し、光から保護するためにホイルで覆うか、または適切な容器に入れます。プレートが2ヶ月以上経過している場合は、必ず準備日を記入して使用を避けてください。