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結核は、結核菌によって引き起こされる感染症であり、肺の結核形成、壊死、膿瘍、線維症および石灰化を特徴とする呼吸器疾患です。また、腎臓、リンパ節、骨、関節、皮膚にも感染します。
この細菌の最初の実験室診断は、顕微鏡下で細菌を視覚化するために染色することです。選択するサンプルは、呼吸器感染症を特定するための痰または気管支肺胞洗浄または実際の組織のサンプルです。
生理
結核菌は、棒状の生物（桿菌）、非可動性、必須ではない胞子です。この細菌は、長さが0.4x3マイクロメートルで、15〜24時間ごとに二分裂（生殖細胞の分裂）を起こします。これは、他の細菌と比較して遅いと考えられています。このため、マイコバクテリウムが培地に現れるまでに最大9週間かかることがあります。
この微生物は紫外線や熱（低温殺菌など）に敏感ですが、化学消毒剤に耐性があります。
グラム染色
結核菌は本当にグラム陽性またはグラム陰性として分類することはできません。この分類は、細菌の細胞壁内のペプチドグリカンの量に基づいて行われます。グラム陽性種にはこの分子の厚い層（約90％）があり、グラム陰性種には薄い層（5％から20％）があります。グラム染色は細胞壁に浸透し、その中の化学成分に結合します。顕微鏡下で、染色された細菌は紫またはピンクに変わります。
結核菌では、細胞壁はペプチドグリカンで構成されていますが、グラム色素の浸透を阻害する複合脂質も含まれています。細胞壁は酸やアルコールによる変色にも抵抗するため、マイコバクテリウムは「酸耐性」と呼ばれています。細胞壁の脂質はミコール酸、ストリング因子、D-ワックスです。細菌が染色された場合、細胞はグラム陽性またはわずかに薄い色でわずかに淡く見えます。
細菌を確認するには、AumarineやZhiel-Neelson染色などの特殊な染色を使用する必要があります。
オーマリン-ローダミン染色
オーラミン-ローダミンを使用するプロセスでは、黄色の蛍光色素を使用して結核菌を蛍光顕微鏡で視覚化します。過マンガン酸カリウムまたはアクリジンオレンジは造影剤として使用できます。レンズの下で、細菌細胞は緑色に見えます。
オーラミン-ローダミン染料は、Zhiel-Neelsonよりも感度が高く、経済的に実行可能です。
Ziehl-Neelsonのカラーリング
Ziehl-Neelson染色は、科学者Franz ZiehlとFriedrich Neelsenによって作成され、加熱された炭水化物フクシン、高濃度の酸アルコール、および緑色マラカイトやメチレンブルーなどの対照染料を使用しています。蛍光顕微鏡下では、細菌細胞は明るいピンク色に見えます。
Ziehl-Neelson色素は、結核菌と結核菌の予備的同定のための卓越性の基準です。
寒天
顕微鏡検査の確認に続いて、結核菌は特別な寒天培地で培養する必要があります。 Lowenstein-Jensenゼラチンには、複雑な有機物質（卵やジャガイモなど）、塩、グリセロール、マラカイトグリーン（他の細菌を阻害する）があります。抗生物質を添加して、微生物の汚染をさらに抑制することができます。この寒天上にサンプルを置き、3〜9週間で菌が増殖します。
アルブミンやビオチンなどの栄養培養液を使用すれば、微量の標的細菌の増殖にも対応できます。これは、Middlebrook 7H9（または7H12）として知られています。
どちらの培地でも、コロニーは小さく、磨かれた淡褐色のコロニーとして現れます。
高度な技術により、結核菌は自動化リーダーを使用して成長させることができます。 Middlebrook 7H9培地の溶液と蛍光指示薬化合物を使用して、増殖を監視し、陽性または陰性の感染を報告します。