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クロマトグラフィーは、化学研究所で未知の成分の同定を行うために広く使用されています。この成分はカラムラッピング材を通って流れ、粒子と相互作用します。粒子とサンプル中の成分間の相互作用は、それらの間の引力または溶解度に基づいています。シース材料の粒子と相互作用しない分子は、支障なく通過することができます。非反応性分子の最大ピークで分子が注入ポイントからシステムに通過するのに必要な時間は、カラムのデッドタイムです。
ステップ1
未知のサンプルを、カラム材料で保持されない少量の化合物で補強します。化合物は、カラム内の包装材と相互作用することなくカラムを通過します。
ステップ2
約20マイクロリットルのサンプルをシリンジにロードし、シリンジの針を注入ポートに挿入します。シリンジをバルブに空けて、サンプルループをバルブからロードします。
ステップ3
クロマトグラフィー機器の電源を入れ、移動相を開始します。このフェーズは、機器を流れ、カラムと廃棄物レセプタクルで終わる検出器を介してサンプルを取ります。
ステップ4
バルブをアクティブにすると、サンプルが流体流路に入ります。これにより、サンプル成分がカラムの上部にロードされ、分離が始まります。
手順5
検出器のエミッタ信号を監視し、クロマトグラフの最初のピークを特定します。強化コンポーネントによって表される、射出時間と最初のピークの最大値の差は、むだ時間です。
手順6
注入ポイントと最初のピークの最大高さの間の距離を測定します。距離に用紙の速度または軸を掛けて、むだ時間を見つけます。